二氧化碳培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的關鍵設備，其穩(wěn)定性和無菌環(huán)境對實驗結果至關重要。以下是日常使用和維護的詳細指南：

一、日常使用規(guī)范
1. 開機前檢查
  確認電源、CO?氣源（壓力≥0.1MPa）和減壓閥連接正常。
  檢查水箱水位（如為水套式），確保覆蓋加熱元件。
  清潔內腔，用75%酒精擦拭內壁、擱板和傳感器探頭。
2. 參數設置
  設定溫度（通常37℃±0.2℃）、CO?濃度（5%±0.1%）及濕度（≥95%）。
  啟用紫外滅菌（如有）30分鐘后再放入培養(yǎng)物。
3. 樣品操作
  穿戴手套，動作迅速，減少開門時間（≤30秒）。
  培養(yǎng)瓶/皿擺放間隔≥1cm，確保氣流循環(huán)。
  記錄放入時間、樣本信息及參數狀態(tài)。
4. 監(jiān)控與校準
  每日記錄溫濕度、CO?濃度（比對紅外傳感器與外部檢測儀）。
  每周用FBS或PBS驗證濕度（蒸發(fā)量≤0.2mL/day）。

二、定期維護要點
1. 清潔消毒
  每周：移除樣品，用無菌蒸餾水擦拭內腔，避免腐蝕性消毒劑損傷傳感器。
  每月：清潔（包括門封條），用0.1%新潔爾滅或過氧化氫噴霧消毒。
  污染處理：霉菌污染時，需空載運行90℃高溫滅菌（若設備支持）。
2. 關鍵部件維護
  HEPA過濾器：每6個月更換或檢測風速（≥0.3m/s）。
  CO?傳感器：每6個月通入標準氣體（如5% CO?）校準，偏差＞0.3%需更換。
  水盤：每周更換無菌蒸餾水，防止微生物滋生（濕度敏感實驗需用超純水）。
3. 長期停用
  排空水箱，斷電前運行空箱干燥程序。
  重新啟用時更換所有過濾器，執(zhí)行3次空載滅菌循環(huán)。

三、常見問題處理
  CO?濃度不穩(wěn)定：檢查氣瓶壓力、管路漏氣（肥皂水檢測）或傳感器故障。
  溫度波動大：確認門密封性（夾紙測試）、水套水量或加熱元件狀態(tài)。
  污染跡象：立即停止使用，滅菌并檢測培養(yǎng)物支原體。

四、安全注意事項
  避免使用乙醇擦拭觀察窗（可能導致龜裂）。
  高溫滅菌時需佩戴隔熱手套，防止燙傷。
  報警功能測試：每月模擬觸發(fā)超溫/CO?不足報警，驗證響應速度。